產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
增強(qiáng)型 DAB 顯色試劑盒是一種借助辣根過(guò)氧化物酶(HRP) ,用于免疫組化顯色、原位雜交顯色或 Western、 Southern 、Northern、EMSA 等膜顯色的試劑盒。 DAB(二氨基聯(lián)苯胺)是辣根過(guò)氧化物酶的常用底物。在 辣根過(guò)氧化物酶的催化下,DAB 會(huì)產(chǎn)生棕色沉淀。該棕色沉淀不溶于水和乙醇。 本產(chǎn)品采用特殊配方,靈敏度高,背景低,重復(fù)性好,儲(chǔ)存穩(wěn)定,使用方便,適合于蛋白印跡、免疫組織 化學(xué)和免疫細(xì)胞化學(xué)、斑點(diǎn)印跡和生物芯片等的染色和顯色反應(yīng)。
操作說(shuō)明:
1. 對(duì)于組織切片或蛋白質(zhì)印記膜,在與辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標(biāo)記的抗體或其它形式的探針?lè)跤?,用適 當(dāng)洗滌液洗滌 3-5 次,每次 3-5 分鐘。
2. 向 5 ml 蒸餾水中加入 250 μl 溶液 A、250 μl 溶液 B、250 μl 溶液 C,并混合均勻,即為 DAB 工作液,1h 內(nèi)使用。注意:溶液 A/B/C 必須完全融化后使用。
3. 向組織切片或膜上加入適量 DAB 工作液,確保能充分覆蓋樣品。
4. 室溫避光孵育 1-30 分鐘,顯色時(shí)間過(guò)長(zhǎng)可引起本底增高,故應(yīng)密切觀察顯色過(guò)程(一般 3-10 分鐘最理想), 并在本底較淺且達(dá)到適當(dāng)顯色強(qiáng)度時(shí)以流水漂洗終止顯色反應(yīng)。
5. 對(duì)于組織切片或細(xì)胞樣品,顯色反應(yīng)終止后可對(duì)其進(jìn)行其他染料復(fù)染。對(duì)于膜,顯色反應(yīng)終止后,可以室 溫晾干避光保存。
注意事項(xiàng):
1.DAB 溶液應(yīng)低溫密封保存。如有結(jié)晶析出,應(yīng)確保結(jié)晶完全溶解再行使用;
2.顯色工作液應(yīng)現(xiàn)用現(xiàn)配,新鮮配制的工作液應(yīng)為無(wú)色或淺棕色,如顏色過(guò)深,請(qǐng)勿使用;
3. DAB 在常溫下不穩(wěn)定,每次取用后均應(yīng)及時(shí)加蓋密封放回冰箱,以免因 DAB 分解影響實(shí)驗(yàn),或因滲 漏造成實(shí)驗(yàn)環(huán)境污染。
4. DAB 有潛在致突變作用,操作時(shí)應(yīng)注意穿戴好防護(hù)用具。
5. DAB 溶液 C 成分為 H2O2,該組分易降解,必要時(shí)可自行配備。